Формед является членом НАСКИ — национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций
iSCREEN- Hep HBsAg
экспресс-тест на гепатит В
ИнТек Продактс инк., Китай
- Форма выпуска: набор / 40 исследований
- Назначение: тест иммунохроматографический для выявления маркера к вирусу гепатита В в сыворотке, плазме и цельной крови
- Состав набора:
• тест-кассета, индивидуально упакованная в пакетик из фольги,
• пластиковая пипетка,
• осушитель,
• инструкция
Инструкция по применению
НАЗНАЧЕНИЕ
Тест-кассета для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) - это быстрый иммунохроматографический метод для качественного выявления поверхностного антигена вируса гепатита В в цельной крови, сыворотке или плазме.
РЕЗЮМЕ
Вирусный гепатит является системным заболеванием, поражающим в первую очередь печень. Причиной большинства случаев острых вирусных гепатитов является вирус гепатита А, вирус гепатита В (HBV) или вирус гепатита С. Комплексный антиген, обнаруживаемый на поверхности HBV. называется HBsAg Прежние названия его - австралийский, или Аи-антиген 1. Наличие HBsAg в цельной крови, сыворотке или плазме является показателем HBV - инфекции - острой или хронической. При типичной инфекции гепатита В HBsAg будет выявляться за 2-4 недели до изменения уровня ALT, и за 3-5 недель перед проявлением симптомов заболевания или развитием желтухи. HBsAg имеет четыре основных подтипа: adw. ayw, adr и аут. Вследствие антигенной гетерогенности детерминант выделяют 10 главных серотипов вируса гепатита В.
Тест-кассета для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) - это быстрый тест для качественного определения HBsAg в цельной крови, сыворотке или плазме. В тесте используется сочетание моноклональных и поликлональных антител для селективного выявления повы- шенных уровней HBsAg в цельной крови, сыворотке или плазме.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Тест-кассета для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/ сыворотка/ плазма) - это качественный твердофазный многослойный иммунотест для выявления HBsAg в цельной крови, сыворотке или плазме. На мембране в тест-кассете на участке тестовой линии сорбированы антителами к HBsAg. Во время тестирования образец цельной крови, сыворотки или плазмы взаимодействует с сорбированными анти-НВзАд-анти- телами. Смесь хроматографически мигрирует вверх по мембране под действием капиллярных сил, чтобы прореагировать с анти-HBsAg-антителами на мембране и сформировать окрашенную линию. Появление такой окрашенной линии указывает на положительный результат, тогда как ее отсутствие указывает на отрицательный результат. В качестве контроля метода в области контрольной линии всегда будет появляться окрашенная линия, указывая на то, что был внесен достаточный объем пробы и что произошло капиллярное увлажнение мембраны, т.е.что процедура анализа проведена правильно.
РЕАГЕНТЫ
Тест-кассеты содержат частицы анти-HBsAg, нанесенные на мембрану
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
- Применять только для профессиональной диагностики in vitro. Не используйте после указанной даты.
- Не ешьте, не пейте и не курите в зоне, где содержатся пробы и наборы для анализа.
- Обращайтесь со всеми пробами так. как будто они содержат инфекционный материал. Во время проведения анализа соблюдайте установленные меры предосторожности против микробиологических рисков и следуйте стандартным процедурам надлежащей утилизации проб.
- При проведении тестирования образцов надевайте защитную одежду, такую как лабораторный халат, одноразовые перчатки и защиту для глаз.
- Влажность и температура могут неблагоприятно влиять на результаты анализа.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Храните тест-наборы при комнатной температуре или в холодильнике (при температуре от +2 до +30'С). Тест-кассета стабильна до даты, указанной на герметичной упаковке. Тест-кассета должна оставаться в герметичной упаковке до применения НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ. Не использовать после указанной даты.
Сбор образцов и подготовка к анализу:
- Тест-кассету для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В (цельная кровь/сыворотка/плазма) можно использовать для анализа цельной крови (из вены или из пальца), сыворотки или плазмы.
- Для отбора проб цельной крови из пальца:
• Вымойте руку пациента теплой водой с мылом или протрите тампоном. смоченным спиртом. Дайте высохнуть.
• Помассируйте руку, не касаясь предполагаемого места укола, потирая руку по направлению к кончику среднего или безымянного пальца.
• Проколите кожу стерильным скарификатором. Сотрите первую каплю крови.
• Слегка помассируйте руку от запястья к ладони и к пальцу, чтобы на месте укола сформировалась круглая капля крови » • Внесите образец цельной крови из пальца в тест-кассету с помощью капиллярной трубки:
- Дотроньтесь концом капиллярной трубки до капли крови, так чтобы в нее набралось примерно 50 мкл. Избегайте пузырьков воздуха.
• Наденьте грушу на верхний конец капиллярной трубки, затем сожмите ее, чтобы выпустить цельную кровь в окошечко для образца (S) на тест-кассете. - Нанесите образец цельной крови из пальца на тест-кассету методом висячей капли: -Поместите палец пациента таким образом, чтобы капля крови находилась как раз над окошечком для образца (S) тест-кассеты.
-Позвольте 2 висячим каплям крови из пальца упасть в центр окошечка для образца (S) тест-кассеты, либо подвиньте палец пациента так. чтобы висячая капля коснулась центра окошечка для образца (S). Не допускайте непосредственного касания пальцем окошечка для образца (S).
- Отделите сыворотку или плазму от остальной крови как можно быстрее, чтобы избежать гемолиза. Используйте только прозрачные, не гемолизированные пробы.
- Тестирование надо проводить немедленно после отбора проб. Не оставляйте пробы на долгое время при комнатной температуре. Пробы можно хранить при температуре от+2 до +8' С в течение 3 дней. При необходимости длительного хранения пробы следует держать при температуре ниже -20* С. Цельная кровь, полученная из вены, может сохраняться при температуре от + 2 до +8° С. если тест нужно провести в течение 2 дней после отбора проб. Не замораживайте пробы цельной крови. Цельную кровь, взятую из пальца, необходимо тестировать немедленно.
- Перед проведением анализа прогрейте пробы при комнатной температуре. Замороженные пробы перед проведением анализа должны полностью оттаять, и их необходимо хорошо перемешать. Пробы нельзя повторно замораживать и прогревать.
- Если пробы необходимо транспортировать, то они должны быть упакованы в соответствии с федеральными правилами, регламентирующими транспортировку инфекционных материалов.
МАТЕРИАЛЫ
Поставляемые материалы
- Тест-кассеты.
- Одноразовые пипетки для образцов.
- Буфер.
- Инструкция по применению
Необходимые, но не поставляемые материалы
- Контейнер для забора проб.
- Скарификаторы (только для цельной крови из пальца).
- Одноразовые капиллярные трубки с гепарином и груша (только для цельной крови из пальца).
- Центрифуга (только для сыворотки/плазмы).
- Таймер.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
Перед тестированием тест-кассеты, пробы, буфер и/или контрольные образцы прогреть до комнатной температуры (от+15 до +30‘ С).
1. Извлеките тест-кассету из герметичной упаковки и используйте ее как можно быстрее. Наилучшие результаты будут получены, если анализ будет проведен немедленно после вскрытия упаковки из фольги
2. Для образцов сыворотки или плазмы:
Держа пипетку вертикально, нанесите 3 капли сыворотки или плазмы (примерно 75 мкл) в окошечко для образца (S) тест-кассеты и включите таймер. См. иллюстрацию ниже Для образцов цельной крови из вены:
Держа пипетку вертикально, нанесите 2 капли цельной крови из вены (примерно 50 мкл) в окошечко для образца (S) тест-кассеты, затем добавьте 1 каплю буфера (примерно 40 мкл) и включите таймер. См. иллюстрацию ниже
При использовании капиллярной трубки:
Заполните капиллярную трубку и перенесите примерно 50 мкл пробы цельной крови из пальца в окошечко для образца (S) тест-кассеты, затем добавьте 1 каплю буфера (примерно 40 мкл) и включите таймер. См иллюстрацию ниже
При использовании метода 'висячей капли':
Позвольте 2-м висячим каплям пробы цельной крови из пальца (примерно 50 мкл) попасть в окошечко для проб (S) тест-кассеты, затем добавьте 1 каплю буфера (примерно 40 мкл) и включите таймер. См. иллюстрацию ниже.
Дождитесь появления красной линии(й). Посмотрите результаты через 15 минут. Не интерпретируйте результаты через 20 минут.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ: красные линии. Одна линия должна быть в контрольной области (С), а другая линия должна быть в тестовой области (Т).
ПРИМЕЧАНИЕ: интенсивность красного цвета в области тестовой линии (Т) будет варьировать в зависимости от концентрации HBsAg в пробе. Поэтому любая интенсивность красного окрашивания в тестовой области (Т) считается положительным результатом.
ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ: одна красная линия появилась в контрольной области (С). В тестовой области (Т) не появилось ни красной, ни розовой линии.
НЕДОСТОВЕРНЫЙ: контрольная линия не появилась. Чаще всего неудача с контрольной линией происходит из-за недостаточного объема пробы или неправильной методики проведения анализа. Проверьте ход выполнения процедуры и повторите анализ с помощью новой тест-кассеты. Если проблема остается, немедленно прекратите использовать данную серию тестов и свяжитесь с местным представителем фирмы.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Внутренние контроли метода включены в тест. Красная линия, появляющаяся в контрольной области (С), является внутренним контролем хода определения. Ее наличие подтверждает внесение достаточного объема пробы и правильность методики выполнения анализа. Контрольные стандарты не прилагаются к этому набору: однако для корректной лабораторной практики рекомендуется тестировать положительный контроль (содержащий 10 нг/мл HBsAg) и отрицательный контроль (содержащий 0 нг/мл HBsAg), чтобы подтвердить методику определения и проверить правильность постановки теста.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Тест-набор для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса HBsAg гепатита В (цельная кровь/сыворотка/плазма) применяется только для диагностики in vitro. Этот тест должен быть использован для выявления поверхностного антигена вируса гепатита В в пробах цельной крови, сыворотки и плазмы. Ни количественные значения, ни уровень концентрации HBsAg нельзя определить с помощью данного качественного теста.
2. Тест-набор для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) только укажет на наличие поверхностного антигена вируса гепатита В в образце, и не может служить единственным критерием для диагностики HBV- инфекции.
3. Как и в случае любых других диагностических тестов, все результаты необходимо рассматривать совместно с остальной клинической информацией, доступной врачу
4. Тест-кассета для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) не может выявить концентрации HBsAg в образцах ниже 1 нг/мл. Если результат теста отрицательный, но сохраняются клинические симптомы. предполагается провести дополнительное тестирование с помощью других клинических методов В любом случае отрица- тельный результат не исключает возможности инфекции гепатита В
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Тест-набор для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) сравнили с ведущим коммерческим тестом на HBsAg - EIA. Корреляция между этими двумя тест-системами составила свыше 99%.
ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность
Тест-набор для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) был протестирован с помощью набора для проверки на чувствительность, включая как подтип ad. так и ay в диапазоне концентраций от 0 до 300 нг/мл. Все 10 подвидов HBsAg давали положительные результаты с помощью тест-набора для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В (цельная кровь/сыворотка/плазма). Тест может выявлять 1 нг/мл HBsAg в цельной крови, сыворотке или плазме за 15 минут.
Специфичность
Антитела, используемые для тест-набора для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) были получены против целого антигена, выделенного из вируса гепатита В. Специфичность тест-набора для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) также была протестирована с помощью лабораторных штаммов вирусов гепатита А и гепатита С. Все тесты с этими штаммами дали отрицательные результаты.
Метод |
EIA | Всего | ||
| HBsAg тест-кассета |
Результаты | Положитель- -ные |
Отрицатель |
|
| Положитель -ные |
200 | 3 | 203 | |
| Отрицатель -ные |
0 | 1062 | 1062 | |
| Всего | 200 | 1065 | 1265 | |
Относительная чувствительность: > 99.0%
Относительная специфичность: 99,7%
Точность: 99,8%
Точность
В одном определении
Сходимость результатов была определена путем использования 15 повторов трех образцов, содержащих 0 нг/мл, 1 нг/мл и 5 нг/мл HBsAg. Отрицательные и положительные значения правильно определялись в 99% случаев.
Между разными постановками
Сходимость результатов между разными постановками теста определялась с использованием тех же трех образцов - 0 нг/мл, 1 нг/мл и 5 нг/мл HBsAg в 15 независимых определениях. Три разных серии тест- наборов для одноэтапного определения поверхностного антигена вируса гепатита В HBsAg (цельная кровь/сыворотка/плазма) были протестированы в течение 3 месяцев с использованием отрицательных, слегка положительных и высокоположительных образцов. Образцы правильно идентифицированы в 99% случаев.
